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上海信裕生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒，檢測試劑盒，白介素試劑盒，試劑盒，重組蛋白，單克隆抗體，多克隆抗體，細(xì)胞系，原代細(xì)胞，胎牛血清，生化試劑，實(shí)驗(yàn)室耗材，abcam抗體等科研產(chǎn)品 |
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2016-11-18 閱讀(188)
哪種抗原修復(fù)方法好些，修復(fù)時(shí)間和溫度如何確定？
1）抗原熱修復(fù)
（1） 高壓熱修復(fù) 在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01M*緩沖溶液（pH6.0）。蓋上不銹鋼高壓鍋的蓋子，但不進(jìn)行鎖定。將玻片置于金屬染色架上，緩慢 加壓，使玻片在緩沖液中浸泡5分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門將會(huì)升起來。10分鐘后，去除熱源，置入涼水中，當(dāng)小閥門沉下去后打開蓋子。本方法適用于較難 檢測或核抗原的抗原修復(fù)。
（2）煮沸熱修復(fù) 電爐或者水浴鍋加熱0.01M*緩沖溶液（pH6.0）至95℃左右，放入加熱10~15分鐘。
（3） 微波熱修復(fù) 在微波爐里加熱0.01M*緩沖溶液（pH6.0）至沸騰后將切片放入，斷電，間隔5~10分鐘，反復(fù)1-2次。適用的抗原 有：AR，Bax，Bcl-2，C-fos，X-jun，C-kit，C-myc，E-cadherin，Chromogranin A，Cyclin，ER，Heat shock protein，HPV，Ki-67，MDMZ，p53，p34，p16，p15，P- glycoprotein，PKC，PR，PCNA，ras，Rb，TopoismeraseⅡ等。
2）酶消化方法
常用 0.1%*和0.4%*液。*使用前預(yù)熱至37℃，切片也預(yù)熱至37℃，消化時(shí)間約為5~30分鐘；*消化37℃時(shí)間為30分 鐘。適用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen，Complement，Cytokeratin，C-erB-2，GFAP，LCA，LN等。
